Quantifier les protéines
Mesurer la concentration
La concentration des protéines peut être mesurer en déterminant l'absorption des noyau phénol du tryptophane et de tyrosines à la longueur d'onde 280nm.
Bradford
La quantité de protéines est déterminée par une gamme de BSA, les protéines sont colorées avec du bleu de Coomassie. Le colorant réagit avec l'arginine, l'histidine et la lysine
Le dosage se fait à 595 nm.
Warning
Incompatible avec le SDS (même à faible concentration), la présence de lipides, et d'acides nucléiques.
BCA
Le dosage colorimétrique des protéines se fait à 562 nm. La réaction se fait par la réaction de réduction du cuivre \(Cu^{2+}\) en \(Cu^+\). Plus les protéines sont concentrées plus la couleur vire du bleu vers le gris.
Warning
Incompatible avec des agents réducteurs et chélatants.
Par spectrométrie
La spectrométrie permet de :
- quantifier une protéine.
Westernblot
Westernblot (ou transfert de protéines) est une méthode combinatoire :
- Électrophorèse sur gel.
- Transfert sur une membrane.
- Coloration des protéines.