Coloration
Coloration
Coloration les plus fréquentes utilisées en [[tissu]] sont :
- HES ou trichrome de Masson (noyau : Hématoxyline de Gill (eau), cytoplasme : Éosine (alcool), MEC : Safran (alcool) ou Bleu d’aniline
- Picro-Indigo-Carmin (noyau : Rouge nucléaire, cytoplasme et MEC : picro-Indigo-Carmin
Warning
Utiliser pour les lavages des solvants des colorants (généralement alcool ou eau).
On ajoute ensuite des produits pour prévenir conservation et de la déshydratation (étape de montage de la lame).
Les colorations
Les tissus sont colorés grâce aux réactions acido-basiques. Il existe deux types de coloration :
- bleue colore les acides (exemple : le bleu de méthyle).
- rouge colore les bases (comme l'ADN, le collagène).
Note
Il existe des mélanges de ces deux solutions appelés trichrome de Masson.
- Pour mettre en évidence des propriétés de réducteur, il est possible d'utiliser la réaction avec la liqueur de Fehling (bleu passa au rouge).
- Pour colorer les noyaux, DAPI qui est un intercalant d'ADN.
Estimation de la mort cellulaire
Marqueur des cellules vivantes
Pour estimer la mort cellulaire, on peut utiliser des substances comme :
- le bleu de Trypan. Lorsque la cellule est en vie elle l'expulse activement. Les cellules apparaissent plus claires.
- MTT qui précipite dans les lysosomes à cause du pH acide.
- Rouge neutre se concentre dans les mitochondries.
Marqueur de mort cellulaire
- Iodure de propidium, un intercalant d'ADN.
- Annexine qui a une affinité avec les phosphatidylsérines. Elle est utilisée pour marquer l'apoptose.