dénaturation ADN

Dénaturation de l'ADN et stabilité des acides nucléiques doubles brins

Dénaturation (opposition hybridation) c'est lorsqu'une molécule biologique perd sa conformation initiale. La dénaturation de l'[[ADN]] consiste à séparer les deux brins c'est-à-dire briser les liaisons d'hydrogènes. Il a deux façons de procéder :

• En modifiant la température.
• En ajoutant des agents chaotropiques.

Agent chaotropique molécule qui dénature l'ADN (exemple : l'urée).

Dénaturation de l'ADN

La température de fusion est donnée par \(2 \cdot (A+T) + 4 \cdot (G+C)\).

Stringence ensemble des conditions de température, pH et de concentrations de ions permettant l'hybridation. Plus les conditions sont favorables à une hybridation plus sa valeur est élevée.

!! note L'utilisation de sels neutralisent les charges et baisse la stringence.

Note

Le pH basique dénature l'ADN.

La température

Lorsque la température augmente, les deux molécules d'ADN se séparent. La résistance des deux brins est liée :

• Aux types bases.
• À l'enchainements des bases.

La résistance à l'agitation thermique dépend des liaisons d'hydrogène entre les bases.

Température de fusion (noté Tm) température lorsque la moitié de l'ADN est dénaturée. Elle dépend de la séquence considérée. Chaque molécule d'ADN est caractérisée par une température de fusion.

Stabilité des complexe bi caténaire ARN/ARN > ARN/ADN > ADN/ADN.